Из-за высокого уровня заболеваемости, наличия соче-танных инфекций урогенитального тракта и др. обстоятельств лабораторная диагностика ИППП занимает доминирующее положение в комплексе врачебных мероприятий.
Принципы лабораторной диагностики ИППП условно делятся на микроскопические, бактериологические (включая культуру клеток), серологические, а также молекулярно-биологические и мало чем отличаются от других заболеваний.
В последние 10-15 лет в этой области наметился значительный прогресс, приведший к созданию новых подходов и методологии постановки диагноза.
Наиболее распространенными и вызывающие угрозу для здоровья нации, экономические и социальные проблемы являются сифилис, трихомониаз, гонорея и хламиди-оз, уровень заболеваемости которыми в России достигает эпидемического.
Сифилис. Основой лабораторной диагностики, которая зачастую является наиболее достоверной, в России служит комплекс серореакций (КСР), заключающийся в реакции микропреципитации (РМП) с кардиолипиновым антигеном и ее модификации реакции связывания комплемента (РСК) с кардиолипиновым и трепонемным антигенами, а также реакции иммунофлюоресценции (РИФ) и ее модификации (РИФабс и РИФ200), и реакция иммобилизации бледных трепонем (РИТ). Эти методы регламентированы Приказом МЗ СССР № 1161, а также рядом инструкций и рекомендаций.
В настоящее время разработаны показания к применению нового КСР: иммуноферментного анализа (ИФА) или реакции пассивной гемагглютинации (РПГА) в комплексе с РМП и отдельно в качестве отборочных и подтверждающих методов диагностики сифилиса. Разрабатываются методики, позволяющие провести раннюю диагностику сифилиса, а также врожденного заболевания, рецидивов инфекционного процесса, оценки эффективности терапии, что связано с выявлением IgM, а также детекции антигена (
T.pallidum) при нейросифилисе и серорези-стентности.
Новый серологический комплекс более чувствителен и специфичен, легко воспроизводим, "быстр" в исполнении, менее субъективен в учете результатов и позволяет автоматизировать процесс постановки диагноза и получить более достоверные результаты.
Трихомониаз. В силу широкого распространения этого заболевания, возможности малосимптомного течения, тяжести осложнений и др. адекватная лабораторная диагностика весьма важна. Основные методы исследований трихомониаза: микроскопия нативных и окрашенных по Граму или другими красителями препаратов, куль-туральная (бактериологическая) диагностика на жидких питательных средах. Серологические исследования (РИФ), используемые в 70-х годах, применяются крайне редко. Разрабатываются методы диагностики, связанные с детекцией
Т.vaginalis - ДНК-диагностика (ПЦР-анализ).
Хламидиоз. Хламидиоз - одно из наиболее распространенных в мире инфекционных заболеваний, в России диагностируется, главным образом, с помощью методов иммунофлюоресценции (ПИФ и НПИФ), регламентируемых Приказом МЗ РФ № 286. ПЦР-анализ нашел широкое применение за рубежом и в России и является весьма чувствительным и специфичным. Однако, существующие в России тест-системы не всегда дают однозначный ответ о наличии (отсутствии) патогенного агента -
С.trachomatis. Метод культуры клеток является высокоэффективным, особенно в первые недели после окончания терапии. Его можно использовать и как критерий излечен-ности. Дискутируется вопрос и получены предварительные результаты по эффективности использования тест-систем для определения антихламидийных IgM на ранних сроках инфицированное(tm). Заслуживает внимания дальнейшее исследование персистенции и латентного течения инфекционного процесса, что, возможно, отчасти объяснит неудачи терапии хламидийной инфекции урогенитального тракта.
Гонорея. Лабораторная диагностика гонореи в последние годы мало изменилась: микроскопия мазков, окрашенных по Граму, и бактериологическое исследование отделяемого пациентов. Существующие приказы МЗ регламентируют использование культуральной диагностики у детей, беременных, а также при хроническом течении патологического процесса. В России и за рубежом имеются лиофильно высушенные питательные среды и разработана методология диагностических исследований.
ДНК-диагностика
N.gonorrhoeae осуществляется редко и не является регламентированным методом обследования.
Таким образом, существует ряд лабораторных подходов к диагностике ИППП. Целесообразным, но не всегда возможным является комплексная оценка результатов исследования. Разработка, унификация и сертификация тест-систем, диагностикумов и создание на этой базе регламентированных методов исследования и алгоритма обследования пациентов с подозрением на ИППП позволит оптимизировать терапевтические мероприятия, избежать рецидивов заболевания.
Разрабатываются и внедряются в практику неинвазив-ные методы лабораторной диагностики ИППП, основанные на иммунохроматографических, ферментспецифиче-ских и др. подходах: исследование по моче, слюне и др.
Более подробно о методах диагностики ИППП и научных исследованиях в этой области можно ознакомиться в соответствующих публикациях, а также в диссертациях, защищенных и выполненных в ЦНИКВИ МЗ РФ.
Таблица 1
Классификация методов лабораторной диагностики
патогенных возбудителей ИППП
1.Микроскопические: а) светооптическая, в том числе тамнолольная микроскопия; б) флуоресцентная микроскопия; в) электронная микроскопия: трансмиссионная (в том числа, улирацитохимия), сканирующая - используется главным образом для научных исследований. 2. Серологические: а) комплекс серологических реакций (КСР): реакция микропреципитации (РМП) и реакция связывания комплемента (РСК); б) реакция иммунофлуоресцоиции (РИФ) и ое модификации; в) реакция иммобилизации бледных трепонем (РИТ) и ее модификации; г) реакция пассивной гемагглютинации (РПГА) и ее модификации; д) иммуноформонтный анализ (ИФА) и его модификации. 3. Культуральные, вт.ч. культура клеток. 4. Молекулярно-биологические: ДНК-гибридизация, ЦПР-анализ, ЛЦР-анализ. 5. Иммунохроматографические и ферментоспецифические (скрининговые). |
|
Таблица 2
Сифилис
Метод | Чувств. % | Специфич. % | Уровень использования | Прим. | Темнопольная микроскопия (прямой тест) | ок. 70 | 100 | практика | Россия, США | Микрореакции: | РМП | ок. 70 | ок. 80 | практика | Россия | RPR | 86-100 | 98 | практика | США | VDRL | 80-100 | 98 | практика | США | TRUST | 85-100 | 98 | практика | США | USR | 80-100 | 99 | практика | США | РСК | ок. 80 | 98 | практика | Россия | РИФ (РИФ_абс, РИФ_200) | 84-99 | 97-99 | практика | Россия | FTA-ABS, FTA-ABS-DS, 19S FTA-ABS | 50-73 | 97 | практика | США | ИФА | 98-100 | 96-100 | практика | Россия | РПГА | 93-98 | 98-100 | практика | Россия | МНА-ТР | 76-100 | 99 | | США | РИТ | 79-94 | 99 | практика | Россия | ПЦР-анализ | 70-91 | 99 | практика разработка | США Россия |
|
Таблица 3
Трихомониаз
Метод | Чувств. % | Специфич. % | Уровень использования | Прим. | Микроскопия: | Нативные препараты | 40-50 | >95 | практика | Россия, США | окрашенные по Грамму | 44-60 | >97 | практика | Россия, США | Иммунофлуоресцентный | данных нет | данных нет | используется редко | Россия | Бактериологическая диагностика | >95 | ок. 100 | практика | Россия, США | ЦПР-анализ | данных нет | данных нет | разработка | Россия |
|
Таблица 4
Гонорея
Метод | Чувств. % | Специфич. % | Уровень использования | Прим. | Микроскопия Грам-мазков | 45-80 | 38 | практика | Россия, США | Бактериологическая диагностика (культура) | 90-100 | 98 | Созданы рецепты питательной среды (ЦНИКВИ и др.) | Россия, США | Дифференцир. видов Neisseria | 90-100 | 100 | практика | Россия, США | ЦПР-анализ | данных нет | данных нет | Создан стандарт (ЦНИКВИ) | Россия, 1997 г. | ЦПР-анализ | данных нет | данных нет | практика | США |
|
Таблица 5
Хламидиоз
Метод | Чувств. % | Специфич. % | Уровень использования | Прим. | Иммунофлуоресценция (ПИФ и НПИФ) | ок. 80 | ок. 80 | контроль | Россия | Иммунофлуоресценция (ПИФ и НПИФ) | ок. 80 | ок. 80 | практика | США | DFA (ПИФ) | данных нет | данных нет | практика | США | Окраска по Романовскому-Гумзе | <40 | <40 | широко использовался до серед. 80-х гг. | Россия | Культура клеток | ок. 80 | ок. 100 | практика | Россия | Иммуноферментный анализ (ИФА) | данных нет | данных нет | контроль | Россия, США | ПЦР-анализ (отечественные тест-системы) | >90 | >90 | практика | Россия | ЛЦР-анализ | данных нет | данных нет | практика | США | ЛЦР-анализ | данных нет | данных нет | разработка | Россия |
|